气相色谱仪GC测定药物中的残留溶剂

 药物中的残留溶剂（ Residual Solvent ）系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能*去除的有机溶剂。由于溶剂没有疗效，故所有残留溶剂均应尽可能除去，以使产品符合其规范、GMP或其他基本的质量要求。

本文的研究目的:控制药物质量，保障病人用药安全。

一、研究方法的建立

气相色谱法（GC法）：为残留溶剂检测的方法，2005版中国药典推荐采用顶空毛细管

二、进样方法
a.直接进样：沸点高的溶剂或受热不易分解的样品

优点：简便、无需设备，进样量大

缺点：污染进样口及柱子，溶剂峰响应大，样品分解产物或溶剂杂质峰可能影响测定，对溶剂的纯度要求高

b．顶空进样：沸点低的溶剂或样品本身对测定有影响

优点：在较低温度下进行，避免组分分解；减少溶解样品的溶剂量和样品本身对色谱系统的干扰和污染，缩短分析时间，增加色谱柱的寿命。

缺点：需要特定的顶空进样装置，成本较高，对沸点较高的溶剂检测灵敏度不够，一般多应用于沸点100℃以下的溶剂

三、供试品溶液和对照品溶液的配制

1.溶剂的要求：能同时溶解样品和待检残留溶剂，不干扰待检残留溶剂的测定，能使样品和待检残留溶剂保持相对稳定。

一般认为水是溶剂，特别是顶空进样系统。因为水中不含有机溶剂，故干扰较少，且在FID检测器上，以水为溶剂时，各残留溶剂的灵敏度较高

2.供试品溶液：样品*溶解，以使其中的残留溶剂释放,否则当残留溶剂被包裹在样品晶格中时就不能被检测出来，可能造成结果与实际情况*不符

水溶**物：水

非水溶**物：不挥发的酸、碱液；DMF或DMSO可以单使用，也可以混合使用

注意：测定含氮的碱性溶剂时，供试品溶液应不呈酸性，以免被测物与酸反应后不易汽化。

测定酯类溶剂时不能采用酸或碱溶液，以免发生水解

对照品溶液：与供试品溶液相同

3.供试品溶液和对照品溶液浓度的确定

根据残留溶剂的限度规定配制供试品溶液和对照品溶液，浓度应能满足系统定量测定的需要。

一般供试品取样量为0.1～1g ，若为限度试验，对照品溶液的浓度可按残留溶剂规定的限度配置；若为定量测定，则按实际残留量配置，浓度相差不超过两倍为宜。必要时，应重新调整 。

四、色谱柱

填充柱:价格便宜，但柱效低，分离复杂样品的能力差

毛细管柱：柱效高，灵敏度高，分离好

i.  分离非极性物质：一般选用非极性柱，各组分按沸点顺序流出色谱柱，沸点低者先出。若试样中有极性组分，相同沸点的极性组分先出峰。

ii. 分离中等极性物质：一般选用中等极性柱，各组分基本仍按沸点顺序流出色谱柱，沸点低者先出。但沸点相同极性与非极性组分，极性组分后出峰。

iii.分离极性物质：一般选用极性柱，各组分按极性顺序流出色谱柱，极性低者先出。

iv. 但按照相似相溶的原理选择色谱柱时，还要注意混合物中组分性质的差别情况，如分离极性与非极性混合物，一般选用极性柱。分离沸点差异较大的混合物，一般选用非极性柱。

v.测定含氮的碱性有机溶剂时，由于普通气相色谱仪的不锈钢管路、进样器衬管等对有机胺等含氮的碱性化合物具有较强的吸附作用，致使其检出的灵敏度降低。通常采用弱极性色谱柱或经碱处理过的色谱柱分析含氮的碱性有机溶剂，如果采用胺分析柱进行分析，则效果更好。

五、检测器

FID ：灵敏度高，通用，线性范围宽，但检测时样品被破坏，一般只能测定含碳化合物.

    N2：H2：Air=1：1~1.5：10

ECD ：是一种高灵敏度、高选择性的检测器。只对含电负性强的元素的化合物如含卤素、硫、氮、羰基、氰基等的化合物有响应。

  特别适合含卤素元素的化合物的测定.

六、定量方法

a)         外标法

b)         内标法

c)         标准加入法:利用加入该组分前后色谱峰响应信号的变化而计算被测组分含量的方法

测定供试品

测定供试品＋对照品

七、其他检测方法
液相色谱法（如测定吡啶）、离子色谱法（如测定N-甲基吡咯烷酮）、气质联用、液质联用、干燥失重法等可作为气相色谱法的重要补充。

八、气相色谱仪GC测定药物中的残留溶剂测定结果判断

确定药物中未知残留溶剂的方法

1、  初选

a)  将供试品配成0.1g/ml的溶液，分别使用非极性的SPB-1和HP-FFAP毛细管柱，按照中国药典2005年版二部附录残留溶剂测定法第二法中各自的程序升温条件，以丁酮为参比溶剂，用顶空气相谱法分别测定药品中各挥发性组分的保留时间，并计算相对于丁酮的相对保留时间（RRT）

b)  将两个色谱系统下得到的RRT与中国药典2005年版二部附录表3中各有机溶剂的RRT参考值进行比较，选择出数据相近（相对误差小于5%）者；而在两个系统中均出现的有机溶剂即可初步判定为药品中可能存在的残留溶剂。

2、  判断

a)  以初选结果为检测对象，参考中国药典2005年版二部附录残留溶剂测定法*法，选择适当的等温色谱系统和色谱条件，将供试品中测得的色谱峰的保留时间与相应的对照品的保留时间比较，并用标准加入法进一步证明初选结果的正确性

b)  对一些微量残留的一类溶剂或工艺中未提及的溶剂，为慎重，可采用GC-MS或GC-IR技术，对所检测到的残留溶剂作进一步的确认。

c)  若必要，可在等温条件下，将样品浓度提高到0.5g/ml，进一步考察样品中可能存在的其他微量元素。